产品搜索
搜索
关键字：
所有分类：
实验中心
订货电话
021-36071889
18701746560
传真订货
021-57930387
电子邮件订货
shbysw@126.com
电话订货时间
周一到周五：9：00-17:30
1/1
浏览量:
0
1
产品描述
产品简介：
我公司活性蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取蛋白。提取过程简单方便，可在1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀、酶活测定等下游蛋白研究。
产品特点：
1、使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。
3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备试剂和仪器
移液器、吸头 离心机及离心管
涡旋振荡器 冰箱，冰盒
使用方法：
细胞蛋白提取：
1. 提取液制备：每 500ul 冷的蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取 5-10×106 个细胞①，在4℃，1000rpm 条件下离心5-10 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每 5×106个细胞中加入500ul 冷的蛋白提取液，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
5. 在 4℃，14000rpm 条件下离心15 分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到蛋白样品。
7. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
注：
① 细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
② 建议用 BCA 法进行蛋白定量。
③ 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
组织蛋白提取：
1. 提取液制备：每 500ul 冷的蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取 100mg 组织样本剪碎，加入蛋白提取液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体①。
3. 将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm 条件下离心5 分钟。
4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到活性蛋白样品。
5. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
上一个
脑组织蛋白提取试剂盒
下一个
植物膜蛋白提取试剂盒
ICP备案:《中华人民共和国电信与信息服务业务经营许可证》编号：沪ICP备12017825号-3 中企动力 上海 提供网站建设