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猪蓝耳病毒IgG抗体检测试剂盒

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产品编号
610302
数量
-
+
1
产品描述

产品名称】

通用名:猪蓝耳病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)

英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus (ELISA)

包装规格 96T×2/盒

预期用途 

试剂盒用于检测猪血清中猪蓝耳病毒抗体。评估猪场猪蓝耳苗免疫状况,感染猪的血清学诊断。

【原    理】

本试剂盒系由包被猪蓝耳病毒(PRRSVGP5+GP6重组蛋白的微孔板和酶标记抗及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清或血浆猪蓝耳病毒特异性抗体。实验时,在包被板中加入对照血清和稀释的待检血清,经温育后,若样品中含有猪蓝耳病毒的特异性抗体,则将与包被板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪450nm波长测定各反应孔中的吸光,即可知样品是否含有特异性抗体

有效期】

于2~8℃避光保存,有效期为12个月。

包被板开封后请于2~8℃避光保存,使用期限为1个月

【试剂盒组成】 

1.

猪蓝耳病毒抗原包被微孔板条

96T×2

2.

酶标记物  红盖

11ml×2

3.

样品稀释液  黄盖

50ml×1

4.

20X浓缩洗涤液  透明盖

40ml×1

5.

底物液A  (白盖

11ml×1

6.

底物液B  (黑盖) 

11ml×1

7.

终止液  黄盖) 

11ml×1

8.

阳性对照 红盖,已灭活

1 ml×1

9.

阴性对照 绿盖,已灭活

1 ml×1

10.

盖板膜

1

11.

自封袋

1

12.

说明书

1

    

【样品制备】  取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染样品短期可于2~8℃保存,长期需置-20保存

【样品稀释】  样品稀释液待检血清按40倍稀释(5μl血清加195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
【洗涤液配制】浓缩洗涤液使用前应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
试验操作方法】

1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

2.取所需用量微孔板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。

3.空白对照孔加样品稀释液100μl阴性/阳性对照孔分别加入阴性/阳性对照血清100μl;样品孔每孔加入稀释后的血清样品100μl。

4.混匀,置37℃反应30分钟。

5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。

6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。

7.洗涤,同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,450nm(630nm作参比波长)测定各孔吸光A450

【结果判定】

    定义:N=阴性对照孔平均A值P=阳性对照孔平均A值S=样品孔A值S/P=样品孔A值/阳性对照孔平均A值

1.正常情况下,N≤0.10P0.50

2.S/P≥0.18时判为阳性,S/P<0.15时判为阴性,0.15≤S/P<0.18判为可疑

当本实验结果为阴性时表明只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。

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