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胞浆蛋白提取试剂盒

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产品编号
BB-3113
数量
-
+
1
产品描述

 

储存条件:
-20℃保存。
有效期:
一年。
产品简介:
本试剂盒提供全套试剂,适用于从细胞和动物组织制备胞浆蛋白。提取过程简单方便,
可在1 小时内完成。制备的胞浆蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。提取
的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活
性测定等蛋白研究。
注意事项:
● 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
使用方法:
使用注意事项:
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
A. 细胞蛋白提取
1. 取 5-10×106 个细胞,在4℃,500×g 条件下离心2-3 分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每 20ul 细胞压积中加入200μl 冷的胞浆蛋白提取液,2ul 蛋白酶抑制剂混合物,高速涡旋振荡15 秒,置冰上10 分钟。
4. 再次高速涡旋振荡 5 秒,然后在4℃,16000×g 条件下离心5 分钟。
5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到胞浆蛋白,请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
B.组织蛋白提取
1. 取适量组织样本剪碎,加冷PBS,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨),冰上静置5 分钟,小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
2. 在 4℃,500×g 条件下离心2-3 分钟,弃上清。
3. 按照细胞蛋白的提取方法的第 3 步骤往下操作即可。
上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。
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