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细菌蛋白提取试剂盒

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产品编号
BB-3123
数量
-
+
1
产品描述

 

注:
● 细菌蛋白提取液: 含多种有效成分,可以充分释放浆蛋白、核蛋白体蛋白和膜蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。
● 蛋白酶抑制剂混合物:包含6种独立的蛋白酶抑制剂,AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、PepstatinA、Bestatin、E-64。
注意:
1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。
2、如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
储存条件:
蛋白酶抑制剂-20℃保存;磷酸酶抑制剂2-8℃保存;蛋白提取液室温保存。
有效期:
一年。
注意事项:
● 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品简介:
我公司细菌总蛋白提取试剂盒可以从各种菌体中提取总蛋白,包括革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌,可用于纯化蛋白的粗品制备及总蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性,可用于报告基因检测、SDS-PAGE 电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验。每毫升菌液大概可以提得5-10mg 蛋白。采用BCA 或Lowry 法进行蛋白定量。
产品特点:
1、使用方便:不需昂贵设备。
2、可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。
4、采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5、含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6、紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
8、本试剂盒中不有 EDTA,与金属螯和层析等兼容。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5. 本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含 EDTA,根据需要可自行加入。
细菌蛋白提取
1、裂解液的准备:根据所需要提取的样本量,每500ul裂解液中加入2ul蛋白酶抑制剂Mix和2ul磷酸酶抑制剂Mix和5ul蛋白稳定液,充分混匀后置冰上备用。
2、在4℃ 12000RPM条件下将菌液离心5min,弃上清,尽量吸干剩余液体,收集菌体,用PBS洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。
3、按每20mg湿重菌体样本加入500ul裂解液,吹打混匀,冰上放置20-30分钟。
4、300w,10s超声/10s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。
5、在4℃ 12000RPM条件下将菌液离心5分钟,将上清移入冷的干净离心管。
6、即得到总蛋白样品。
7、将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱或直接用于下游实验。
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