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冻存样本核蛋白提取试剂盒

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产品编号
BB-3166
数量
-
+
1
产品描述

储存条件:
蛋白提取液2-8℃保存;蛋白酶抑制剂-20℃保存。

有效期:

一年。

产品简介:

我公司冻存样本核蛋白提取试剂盒适用于从各种经过冻存的细胞和各种实体组织中提取核蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的核蛋白纯度高,较少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

产品特点:

1、 使用方便。将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。

2、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。

3、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。

4、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

 

试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
●旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
●实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1. 提取液制备:每 200ul 冷的蛋白提取液A 和B 中分别加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 样本解冻后,取适量组织样本(细胞样本直接进行第4 步),加冷PBS,用组织匀浆器匀浆①至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨),冰上静置5 分钟,小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
3. 在 4℃,1000×g 条件下离心2-3 分钟,弃上清。
4. 每 100mg 组织样本或50ul 细胞压积中加入200μl 冷的提取液 A,高速涡旋振荡
15 秒,置冰上10 分钟。
5. 再次高速涡旋振荡 5 秒,然后在4℃,16000×g 条件下离心5 分钟。
6. 沉淀用 PBS 洗涤一次,然后在4℃,16000×g 条件下离心5 分钟,弃上清。
7. 在沉淀中加入 100μl 冷的提取液B,高速涡旋振荡15 秒。
8. 置冰上 40 分钟,每隔10 分钟高速涡旋振荡15 秒。
9. 在 4℃,16000×g 条件下离心10 分钟。
10. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到核蛋白。
11. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

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