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胞浆蛋白提取试剂盒(2D电泳用)
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胞浆蛋白提取试剂盒(2D电泳用)

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产品编号
BB-31812
数量
-
+
1
产品描述

 

储存条件:
-20℃保存。
有效期:
一年。
产品简介:
本试剂盒提供全套试剂,适用于从细胞和动物组织制备胞浆蛋白。提取过程简单方便,可在1 小时内完成。制备的胞浆蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。提取的蛋白可直接用于双向电泳。
注意事项:
● 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
使用方法:
使用注意事项:
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
细胞胞浆蛋白提取:
1. 提取液制备:每 500ul 的胞浆蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后备用。
2. 取 5-10×106 个细胞①,在4℃,2500rpm 条件下离心5-10 分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每 5×106 个细胞中加入500ul 的胞浆蛋白提取液,混匀后,振荡15-20 分钟。
5. 在 14000rpm 条件下离心15 分钟。
6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到胞浆蛋白。
7. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
注:
① 细胞数量根据实验情况调整,每次的裂解液用量并不是一定的,请根据实际情况调整。
② 建议用 BCA 法进行蛋白定量。
③ 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
组织胞浆蛋白提取:
1. 提取液制备:每 500ul 的胞浆蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后备用。
2. 取 100mg 组织样本剪碎,加入胞浆蛋白提取液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体①。
3. 将组织匀浆吸入干净离心管中,在 14000rpm 条件下离心5 分钟。
4. 将上清吸入另一干净离心管,即可得到胞浆蛋白。
5. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
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