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丝状真菌蛋白提取试剂盒(2D电泳用)
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丝状真菌蛋白提取试剂盒(2D电泳用)

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产品编号
BB-3194
数量
-
+
1
产品描述

产品简介:

我公司丝状真菌蛋白提取试剂盒(二维电泳用)适用于从各种丝状真菌中提取总蛋白。优化的裂解液配方可以充分释放各种有隔膜菌丝和无隔膜菌丝蛋白以及各种菌丝变态体蛋白,提取过程简单方便,可在1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。提取的蛋白用于二维电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE 电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒,请联系本公司,选择其他货号产品。

试剂盒以外自备试剂和仪器

● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管

● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒

使用方法:

使用注意事项:

旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。

 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。

 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1. 提取液制备:每 500ul 丝状真菌蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。

2. 取培养丝状真菌,在 4℃,3000rpm 条件下离心5-10 分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集菌体。

3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 将菌体置于研钵中用液氮研磨 15 分钟左右至粉末。若无液氮研磨条件,可直接用蛋白提取液研磨。

5. 每 100mg 菌体中加入500ul 蛋白提取液,混匀后,在4℃条件下振荡15-20 分钟。

6. 在 4℃,14000rpm 条件下离心15 分钟。

7. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到真菌总蛋白。

8. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验

注:

① 菌体数量根据实验情况调整,每次的裂解液用量并不是一定的,请根据实际情况调整。

② 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。

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