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细胞蛋白提取试剂盒

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产品编号
BB-3121
数量
-
+
1
产品描述

 

储存条件:
蛋白酶抑制剂-20℃保存;磷酸酶抑制剂2-8℃保存;细胞蛋白提取液室温保存。
有效期:
一年。
注意事项:
● 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管
底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品简介:
我公司细胞总蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞中提取总蛋白。提取过程简单方便,可在1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
产品特点:
1、使用方便,从细胞中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。
3、含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
4、紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5. Western 实验内参可以选用beta-actin、GAPDH、Tubulin。
6. 更多蛋白提取常见问题分析等资料可以联系本公司索取。
1. 提取液制备:每 500ul 冷的细胞蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物和2ul 磷酸酶抑制剂,混匀后置冰上备用。
2. 取 5-10×106 个细胞①,在4℃,1000rpm 条件下离心5-10 分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每 5×106 个细胞中加入500ul 冷的总蛋白提取液,混匀后,在4℃条件下振荡15-20 分钟。
5. 在 4℃,14000rpm 条件下离心15 分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白。
7. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
注:
① 细胞数量根据实验情况调整,每次的裂解液用量并不是一定的,请根据实际情况调整。
② 建议用 BCA 法进行蛋白定量。
③ 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
使用本产品发表的部分新文献:
● 高剑 叶彬等 刚地弓形虫RH株速殖子对小鼠结肠癌细胞ct26体外增殖和细胞周期的影响
中国人兽共患病学报 2010年12期
● WJ Chen, H Wang, Y Tang, CL Liu, HL Li, WT Li
Multidrug resistance in breast cancer cells during epithelial-mesenchymal transition is
modulated by breast cancer resistant protein
Chin. J. Cancer. 2010. 29(2):159-165
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