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丝状真菌蛋白提取试剂盒

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产品编号
BB-3136
数量
-
+
1
产品描述

 

注:
● 丝状真菌蛋白提取液: 含多种有效成分,可以充分释放蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。
● 蛋白酶抑制剂混合物:包含7种独立的蛋白酶抑制剂,AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、PepstatinA、Bestatin、E-64、EDTA。
注意:
1、蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。
2、如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
储存条件:
蛋白酶抑制剂-20℃保存;蛋白提取液室温保存。
有效期:
一年。
注意事项:
● 本试剂盒仅供科学研究使用。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品简介:
我公司丝状真菌蛋白提取试剂盒适用于从各种丝状真菌中提取总蛋白。优化的裂解液配方可以充分释放各种有隔膜菌丝和无隔膜菌丝蛋白以及各种菌丝变态体蛋白,提取过程简单方便,可在1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、
免疫共沉淀等下游蛋白研究。
本试剂盒提取的蛋白不可用于2D 电泳。如下游实验需要用于2D 电泳,请使用货号BB-3194 的试剂盒。
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1. 提取液制备:每 500ul 丝状真菌蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取培养丝状真菌,在 4℃,3000rpm 条件下离心5-10 分钟,小心吸取培养基,
尽可能吸干,收集菌体。
3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 将菌体置于研钵中用液氮研磨 15 分钟左右至粉末。若无液氮研磨条件,可直接用蛋白提取液研磨。
5. 每 100mg 菌体中加入500ul 蛋白提取液,混匀后,在4℃条件下振荡15-20 分钟。
6. 在 4℃,14000rpm 条件下离心15 分钟。
7. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到真菌总蛋白。
8. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
注:
① 菌体数量根据实验情况调整,每次的裂解液用量并不是一定的,请根据实际情况调整。
② 建议用 BCA 法进行蛋白定量。
③ 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被细菌污染。
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