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产品编号
BB-3502
数量
-
+
1
产品描述
储存条件:2-8℃避光保存。
有效期:一年
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
●禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前
清洗并彻底清除残留清洁剂。
●避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品简介:
免疫印迹最重要也是最后一步就是酶与底物反应进行检测,本试剂盒以化学荧光发光方法检测蛋白质或核酸类生物大分子。其原理是,蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上,以一抗及辣根过氧化物酶HRP 标记的二抗结合膜上的目的蛋白,或以HRP 标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后用本产品配制的ECL 工作液,在可见光下室温孵育膜数分钟,将印迹膜用保鲜膜包被粘贴固定于X 光片曝光暗盒。然后转入暗室将X 光胶片压在膜上曝光数秒到数分钟至数小时。显影定影后蛋白质或核酸条带可清晰显示在X 光胶片上。也可不进行X 光胶片曝光直接对印迹膜进行荧光CCD 扫描。
产品特点:
1、高灵敏度
2、低背景
试剂盒以外自备试剂和仪器
● 移液器、吸头 ● 双蒸水
使用方法:
使用注意事项:
● ECL 工作液配制过程中吸取试剂I 和试剂II 时务必跟换吸头,工作液新鲜配制后立即使用,放置过久会影响灵敏度。
●根据蛋白丰度不同曝光时间可能是数秒至数小时。
●曝光时间过长会使背景加深,曝光不足会导致条带模糊。
●如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 发光和曝光。
● 应使用高质量保鲜膜。
1. 使用合适的方法进行 Western,直至用PBST 洗涤二抗。
2. 新鲜配制 ECL 工作液:试剂A 和试剂B 按1:1 混合后, 用双蒸水10 倍稀释,混合后即为ECL 工作液。须立即使用!
3. 印迹膜蛋白面朝上,用 ECL 工作液均匀滴加至印迹膜室温孵育1-2 分钟。ECL 工作液使用量大约为0.125ml/cm2 膜或根据个人实验习惯使用。
4. 用平头镊夹住印迹膜,垂直置于吸水纸以吸去多余工作液。
5. 快速将印迹膜置于二层保鲜膜之间,尽量赶尽气泡。
6. 将印迹膜蛋白面朝上,放于 X 光胶片暗盒内。在暗室内放入X 光片,曝光,显影。
使用本产品发表的部分新文献:
● Guanglin Zhanga et al. Gypenoside attenuates white matter lesions induced by chronic
cerebral hypoperfusion in rats
Pharmacology Biochemistry and Behavior 2011, Volume 99, Issue 1 (IF=2.624)
● Dun-Quan Xu,Ying Luo, Yi Liu et al. Beta-estradiol attenuates hypoxic pulmonary
hypertension by stabilizing the expression of p27 kip1 in rats
Respiratory Research 2010, 11:182 (IF=2.86)
● Hao Liua, Anmin Chena et al. A short-hairpin RNA targeting osteopontin downregulates
MMP-2 and MMP-9 expressions in prostate cancer PC-3 cells
Cancer Letters 2010 Volume 295, Issue 1, Pages 27-37 (IF=4.864)
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